
高壓細胞破碎法
細胞破碎方式可規(guī)納為機械法和非機械法兩大類。細胞破壁的方法很多,按照是否存在外加作用力,可分為機械法和非機械法。按照物理和非物理方法可分為物理法和化學(xué)法。物理方法主要有:根據(jù)破壁溫度可分為低溫物理破壁,超低溫物理破壁;根據(jù)用力情況可分為高速撞擊破壁,剪切力破壁等,非物理方法主要有化學(xué)試劑法及生物酶解法。
物理破碎法的缺點是高能、高溫、高噪音、高剪切力,易使產(chǎn)品變形失活;非專一性,胞內(nèi)產(chǎn)物均釋放,分離純化困難;細胞碎片大小不一,難分離。化學(xué)破碎法缺點是費用高;引起新的污染,尤其是其他化學(xué)方法;一般只有有限的破碎,常需與其他物理法連用。酶解需要選擇適宜的酶和酶系統(tǒng),并要決定特定的反應(yīng)條件,還常附加其他的處理,如輻照、加高濃度鹽及EDTA,或者利用生物因素等促使微生物對酶解作用敏感,以獲得一定的效果。
破碎方法選擇的一般原則是提取產(chǎn)物在細胞質(zhì)內(nèi),用機械法破碎;提取產(chǎn)物在細胞膜附近,用化學(xué)法;提取產(chǎn)物與細胞膜和細胞壁結(jié)合,可采用化學(xué)法和機械法結(jié)合的方法。選擇合適的破碎方法需要考慮細胞的數(shù)量、目的產(chǎn)物對破碎條件(溫度、化學(xué)試劑、酶等)的敏感性;破碎程度及破碎速度;細胞壁的堅韌長度;產(chǎn)物的性質(zhì)如耐酸、耐熱等。每一步應(yīng)注意全面考慮操作度、對細胞的剪切程度、蛋白酶的失活作用等。
采用高壓細胞破碎法,處理量大、破碎速度較快。細胞破碎是為目標產(chǎn)物的釋放創(chuàng)造條件,為了最大程度的獲得活性產(chǎn)物,而不是最終目的。此過程中只發(fā)生物質(zhì)狀態(tài)的變化,而無化學(xué)反應(yīng)變化;是物質(zhì)量的分配,而不是質(zhì)的飛躍。高壓細胞破碎儀通過高壓破壁技術(shù)使物料在柱塞作用下進入可調(diào)節(jié)壓力大小的閥組中經(jīng)過特定寬度的限流縫隙均質(zhì)區(qū)在均質(zhì)閥內(nèi)產(chǎn)生三種效應(yīng):空穴效應(yīng)、撞擊效應(yīng)、剪切效應(yīng)的機械作用力從而打破細胞壁的束縛達到高效率破碎細胞的效果。高壓細胞破碎儀利用高壓原理對細胞進行擠壓破碎,使樣品均勻并完全的碎裂,特別適用于厚壁細胞、較濃樣品的破碎,具有無噪音、溫升少、無金屬離子污染等特點。采用高壓細胞破碎法,處理量大、破碎速度較快。
高壓細胞破碎儀是生物學(xué)研究中一種重要的實驗、生產(chǎn)設(shè)備,能夠快速、高效地將細胞破碎并釋放其細胞內(nèi)成分。它在蛋白質(zhì)、DNA和RNA的提取等方面有著廣泛的應(yīng)用,并在微生物學(xué)和植物學(xué)等領(lǐng)域也發(fā)揮了作用。高壓細胞破碎儀可以用于提取細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。在研究蛋白質(zhì)功能和結(jié)構(gòu)時,需要大量的純化蛋白質(zhì)來進行進一步的實驗,可以將細胞破碎并將細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)釋放出來,為后續(xù)的純化提供了便利;可用于提取其他細胞內(nèi)的成分,如DNA和RNA。在遺傳學(xué)研究中,需要提取DNA和RNA來進行分析和測序??梢钥焖俚貙⒓毎扑椴NA和RNA釋放出來,為后續(xù)的實驗操作提供了基礎(chǔ);可以用于生物學(xué)的其他研究領(lǐng)域,如微生物學(xué)和植物學(xué)。在微生物學(xué)中可以用于研究細菌、真菌和其他微生物的細胞壁結(jié)構(gòu)和代謝產(chǎn)物。在植物學(xué)中可以用于提取植物細胞壁和細胞質(zhì)分離出不同的細胞組分,以便進行更深入的研究。
高壓細胞破碎優(yōu)勢
◆避免使用溶劑或化學(xué)品來破壞細胞壁
◆避免集中材料進一步昂貴的凈化處理
◆確保產(chǎn)品高的品質(zhì)保證
◆非常高效的生產(chǎn)流程,在保持高的產(chǎn)量的同時,能最大限度地從有價值地源頭材料中獲得收益

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